• 扶桑薬品工業では、CHO 細胞を用いた恒常発現細胞株の構築サービスを行っています。
• CHO 細胞発現系では、糖鎖修飾等の翻訳後修飾が付加されるので、機能的なタンパク質の生産が期待されます。
• 抗体等の分子量の大きい・複雑なタンパク質の発現も可能で、さまざまな用途 ( 検査試薬用の抗体や細胞培養時に使用するタンパク試薬等 ) に利用できます。

タンパク質大量発現細胞の構築について

• 当社では、北海道大学教授、鈴木定彦先生のご協力の元開発した、高発現ベクター ( 図 1 ) に目的タンパク質の cDNA を導入し、CHO DG44 細胞を宿主として発現させます。
• このプラスミドが細胞内のゲノム中で高発現部位 ( 転写ホットスポット ) に組み込まれた細胞だけが効率よく生育できるように設計されています。
• 私たちの検討では、他社の発現系と比べ 7 倍以上の産生量を示し、高産生 ( 図 2 ) かつ継代安定的 ( 表 1、図 3 ) な細胞株 ( セルプール ) が得られています。

実施結果例

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図 3：TOPクローンのフェッドバッチ培養における産生量の比率

扶桑薬品工業の受託サービスについて

Parent Cell Bank ( PCB：MCB 候補株 ) stock の作製

作業日数目安：15-17 週間

セルプール又は PCB の培養及び精製^※2

作業日数目安：6-8 週間

• ご希望するスケールでの培養条件 ( リアクター、WAVE ) について検討します。
• 培養スケールに応じた精製法を検討します。
• 当社での対応が難しい大量培養及び精製につきましては、当社から CDMO に再委託し精製物を納品いたします。

※1：生物活性等、その他の測定項目につきましてはお問い合わせください。
※2：既に PCB あるいは MCB をお持ちのお客様におかれましては、培養及び精製のステップのみの発注にも対応いたします。

精製に関して

• 抗体 ( IgG ) の精製は、ProteinA アフィニティクロマトによる精製を実施します。ご要望に応じて各イオン交換クロマトを組合わせた多段階での精製も実施いたします。
• その他のタンパク質についても、各種クロマトにて精製が可能です。
• 精製方法が確立されていないタンパク質につきましては、精製方法の検討 ( 精製カラムのスクリーニング～精製工程の確立 ) も実施可能です。

培養条件検討、精製検討に使用する装置について

・培養条件の検討
　フラスコ、Ambr® 15 ( Sartorius ) 等

・培養スケールアップ検討
　Ambr® 15、アドバンストコントロールバイオリアクターシステム BR1000 ( 横河電機株式会社 ) 等

・大量培養での検討
　ReadyToProcess WAVE^TM 25 ( Cytiva )

・精製検討 ( カラムスクリーニング、スケールアップ等 )
　ÄKTA^TM avant 150 (Cytiva)

実施施設

• 細胞の構築及び培養はクリーンルーム内、必要に応じて同室内にあるクリーンベンチ内で実施します。
• 得られたタンパク質の精製につきましては、一般の実験室内での実施となります。

納品物

納品/価格

詳細は、下記のお問い合わせ先にお問い合わせください。

本受託サービスについてのお問い合わせ

扶桑薬品工業株式会社　研究開発センター　創薬研究部バイオ医薬研究課

〒536-8523 大阪市城東区森之宮二丁目3番30号
E-mail : cellhandle@fuso-pharm.co.jp
Fax : 06-6964-2706